RealCarrier核酸助沉劑
RealCarrier Nucleic Acid Precipitation Solution
● 產(chǎn)品貨號及規(guī)格：
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產(chǎn)品編號
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產(chǎn)品名稱
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包裝
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貯存
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RTP3101-01
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RealCarrier核酸助沉劑
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2×1ml
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4℃
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NA1050-03
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3M NaAc pH5.2
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5 ml
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RT
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說明書
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一份
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-
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● 產(chǎn)品簡介：
RealCarrier核酸助沉劑是幫助核酸在乙醇中沉淀的一種非動物源性的核酸沉淀專用試劑。乙醇低溫沉淀是回收液體樣品中DNA和RNA的最常用方法。然而乙醇沉淀并不能完全回收樣品中的核酸，特別是在回收微量(＜5ng/μl)或者低片段(＜200bp)核酸時，損失更為嚴重(有數(shù)據(jù)表明，單獨的乙醇沉淀只能回收50%的此類DNA和RNA)。RealCarrier核酸助沉劑是一種分子生物學級的非動物源性的多聚物溶液，在乙醇沉淀時加入4-6 μl RealCarrier核酸助沉劑即可明顯提高核酸沉淀的得率，可使痕量DNA(＜5ng/μl)的回收率達到95-98%，同時可選擇性去除短引物(<20bp)片段和dNTP。與生物源性的核酸沉淀助劑如糖原（有文獻報道，糖原影響DNA-蛋白質(zhì)的相互作用）和tRNA相比（tRNA會影響多聚核苷酸激酶對DNA的磷酸化），RealCarrier核酸助沉劑本身無核酸污染也無DNA酶和RNA酶活性，同時不影響酶切、連接、轉(zhuǎn)錄、PCR、轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)染等。RealCarrier核酸助沉劑已成為最常用的核酸助沉劑。
按照400 μl核酸樣品使用5 μl RealCarrier核酸助沉劑計算，該產(chǎn)品可以至少使用400次。
● 貯存：
4℃貯存。有效期二年。
● 使用說明：
1. 按照下表，在1.5ml離心管中依次加入DNA樣品，0.1倍樣品體積3MNaAc pH5.2，5μl RealCarrier，2.5倍樣品體積無水乙醇，混合均勻；當樣品體積大于400
μl時，可按每100 μl加入1μl RealCarrier的比例增加使用量，如700μl樣品，加8μl RealCarrier。
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不同體積的DNA樣品處理
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DNA樣品
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100 μl
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200 μl
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300 μl
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400μl
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3M NaAC pH5.2
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10 μl
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20 μl
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30 μl
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40 μl
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RealCarrier
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5 μl
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5μl
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5μl
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5μl
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無水乙醇
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250 μl
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500 μl
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750 μl
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1000 μl
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注：a 待回收的核酸樣品濃度要在10 pg/μl至100 ng/μl之間。過高濃度的樣品使用本產(chǎn)品會降低回收效率，高于300 ng/μl的樣品不要使用本產(chǎn)品，可以直接使用經(jīng)典的乙醇沉淀方法回收。
b 加入RealCarrier核酸助沉劑后無需低溫孵育，低溫孵育反而會降低回收效率?；靹蚝笳堉?
接進行離心步驟。
2.
12000rpm 常溫離心10分鐘。
3. 棄上清，加入1ml 70%乙醇漂洗沉淀；12000rpm
常溫離心5分鐘。
4. 棄上清，快甩離心，用10 μl微量移液器徹底吸棄殘余乙醇，常溫開蓋干燥1-2分鐘干燥沉淀。
注：干燥時間不要過久，過分干燥的核酸樣品不易溶解；干燥時間也不能過短，殘余的乙醇會影響核酸樣品的后續(xù)操作，如抑制內(nèi)切酶的活性。
5 沉淀溶解于1×TE或超純水中，-20℃保存。