臺盼藍染色液（Trypan Blue Staining Solution）
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產(chǎn)品組成：
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組分貨號
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名稱
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規(guī)格
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貯存
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TB0515
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臺盼藍染色溶液
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50
ml
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4℃
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說明書
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一份
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● 產(chǎn)品簡介：
臺盼藍（Trypan Blue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍，是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性與細胞的存活率，是組織和細胞培養(yǎng)中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。正常的活細胞細胞膜結構完整，能夠排斥臺盼藍，細胞不會被染成藍色；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞可被臺盼藍染成藍色。臺盼藍可被巨噬細胞吞噬，故可用于巨噬細胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺盼藍拒染現(xiàn)象，因此臺盼藍溶液不能區(qū)分凋亡細胞和死亡細胞。臺盼藍染色后，通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù)，就可以對細胞存活率進行比較精確的定量。染色時間只需 3-5 分鐘，操作簡單。
● 貯存：
4℃保存，一年有效。
● 操作步驟：
1.收集細胞：
對于貼壁細胞先用胰酶消化液消化細胞，用適量細胞重懸液（Hank’s液或生理鹽水）重懸細胞；對于懸浮細胞，1000-2000g離心1分鐘收集細胞，棄上清，用適量細胞重懸液重懸細胞。
2.臺盼藍染色：
吸取100微升重懸的細胞到1.5 ml離心管內，加入100微升臺盼藍染色液，輕輕混勻，染色3分鐘 (染色3分鐘時間已經(jīng)足夠，但染色時間可以更長一些，但不宜超過10分鐘)。
3.計數(shù)：
吸取少量經(jīng)過染色的細胞，用血細胞計數(shù)板計數(shù)。通常如果要比較精確地進行定量，每個細胞樣品至少數(shù)500個細胞，數(shù)出藍色細胞和細胞總數(shù)。
細胞存活率＝(細胞總數(shù)－藍色細胞數(shù))/細胞總數(shù)×100%
● 注意事項：
1. 染色時間不能太長，否則活細胞也會逐漸積累染料而染成顏色，使檢測結果偏低。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
實驗示例：
Jurkat細胞臺盼藍染色結果，深藍色細胞為死細胞