Anti-PCNA抗體（鼠單抗）
Anti-PCNA Antibody（Monoclonal Antibody from Mouse）
|
產(chǎn)品編號
|
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
|
APM5012
|
Anti-PCNA抗體（鼠單抗）
|
50 μl
|
● 產(chǎn)品簡介
增殖細(xì)胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE（系統(tǒng)性紅斑狼瘡）患者的血清中首次發(fā)現(xiàn)并命名，因其只存在于正常增殖細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞內(nèi)而得名，以后的研究發(fā)現(xiàn)PCNA與細(xì)胞DNA合成關(guān)系密切，在細(xì)胞增殖的啟動上起重要作用，是反映細(xì)胞增殖狀態(tài)的良好指標(biāo)。PCNA是一種分子量為36 kD的蛋白質(zhì)，在細(xì)胞核內(nèi)合成，并存在于細(xì)胞核內(nèi)，為DNA聚合酶δ的輔助蛋白，該蛋白對聚合酶的持續(xù)合成能力起重要作用。在細(xì)胞核內(nèi)存在可溶性與不溶性兩種PCNA，可溶性PCNA在細(xì)胞周期各期中均有表達(dá)，其量在DNA合成過程中不發(fā)生明顯變化，易被去污劑提取、甲醇破壞；不溶性PCNA較穩(wěn)定，不易被去污劑洗脫、甲醇破壞，這種PCNA在G0～G1期細(xì)胞中無明顯表達(dá)，G1晚期，其表達(dá)大幅度增加，S期達(dá)到高峰，G2～M期明顯下降，其量的變化與DNA合成一致，檢測其在細(xì)胞中的表達(dá)，可作為評價(jià)細(xì)胞增殖狀態(tài)的一個指標(biāo)。
|
來源
|
用途及稀釋比例
|
抗體類型
|
PCNA分子量
|
|
Mouse
|
WB 1:2000-5000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
|
單克隆抗體
|
36 kD
|
注：WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測，至少可以檢測50次。
● 貯存形式：
穩(wěn)定溶液，1 mg/ml抗體溶于PBS，50%甘油，pH7.2。
● 保存及運(yùn)輸條件：
-20℃保存，一年有效；避免反復(fù)凍融；濕冰運(yùn)輸。
● 使用說明：
1. Western Blot雜交(ECL顯色)：1:2000-5000稀釋，常溫孵育1-2 h或4℃過夜。
2. 免疫熒光（IF）和免疫組化（IHC）：1:200-1000稀釋。
● 實(shí)驗(yàn)示例：
1 2 3 4 5
lane 1，5：ECL Marker；lane 2：總蛋白TP；lane 3：細(xì)胞漿蛋白，C-Pr；lane 4：細(xì)胞核蛋白，N-Pr
Jurkat蛋白提取：總蛋用RIPA（貨號：RL1020 ）提取。胞漿蛋白和核蛋白用動物細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒（貨號：RTD8301）提取。
制膠和電泳：RealPAGE plus彩色凝膠快速制備試劑盒（貨號：RTD6132-15）；200 V 55 min
轉(zhuǎn)膜：NC膜，1×RealBlot快速轉(zhuǎn)膜液 400 mA 37 min
封閉：Western無蛋白快速封閉液（貨號：PF1070） RT封閉 20 min
一抗： Anti-PCNA抗體（鼠單抗）（貨號：APM5012） 1：5000
二抗：HRP標(biāo)記羊抗鼠IgG（貨號：HGM1060）1：5000
ECL發(fā)光：RealECL發(fā)光液（貨號：EC2520）；化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)（貨號：RT523）拍照。